索拉非尼(sorafenib)、多吉美(tosylate)抑制肝癌细胞生长-

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所属分类:疗效
摘要

我们研究了TAMs在肝癌索拉非尼(多吉美)耐受药物中的作用。为此,我们首先使用人单细胞细胞系THP-1,通过PMA分化细胞建立M1巨噬细胞和M2巨噬细胞模型,然

  在HCC中已经证明,M2巨噬细胞能够通过产生IL-1的广角蛋白和HGF47来改善EMT肿瘤转移扩散,而M1巨噬细胞通过不同的整合素-rhoGTPase-Hippo途径来抑制肿瘤转移扩散。有趣的是,最近有报道称索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))在原位小鼠模型中通过JAK-STAT3讯号通路下调HTATIP2的表达,从而诱导EMT并促进肝癌细胞的侵袭
索拉非尼(sorafenib)、多吉美(tosylate)抑制肝癌细胞生长-
和转移扩散。

  我们研究了TAMs在肝癌索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))耐受药物中的作用。为此,我们首先使用人单细胞细胞系THP-1,通过PMA分化细胞建立M1巨噬细胞和M2巨噬细胞模型,然后区别用LPS+IFN-转染或IL-4+IL-13极化分化的巨噬细胞。36个形态学表型、基因表达基因型和巨噬细胞标记物表达的鉴定表明,thp-1来源的M1巨噬细胞和M2巨噬细胞在多个方面区别与肿瘤相关的M1巨噬细胞和M2巨噬细胞相似。将HCC细胞(SMMC7721、Hep3B、Sk-Hep1)与THP-1CM共培养,M1巨噬细胞不影响肿瘤细胞的增殖和集落形成,而M2巨噬细胞显著促进了肿瘤细胞的增殖和集落形成。索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))能明显抑制肝癌细胞的生长、集落形成和迁移。有趣的是,M2-cm显著减少了索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))抑制肝癌细胞生长、集落形成和迁移的能力,而M1-cm则没有这种作用,提示M2而不是M1通过分泌可溶性因子促进了肝癌中索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))的耐受药物。

  已知TAMs产生多种要素,其中一些如CCL22和IGF-1可能导致索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))耐受药物。通过对M1巨噬细胞和M2巨噬细胞基因表达差异的筛选,我们发现M2巨噬细胞大量表达HGF,并且比M1巨噬细胞多表达约30倍HGF。用重组人HGF替代M2-CM可减轻索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))抑制肝癌细胞生长、集落形成和迁移的能力。在M2-cm上加入抗HGF能够抑制M2-cm对索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))的作用,这表明M2-cm中的HGF在维持肿瘤生长和转移扩散的M2巨噬细胞对索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))的肝癌抵抗中发挥了主要作用。除了肿瘤相关的M2巨噬细胞,恶性肿瘤相关的成纤维细胞和肝癌细胞也产生大量的HGF,这可能有助于获得索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))耐受药物。为了进一步探讨其机制,我们评估了肝癌细胞中HGF/c-Met、ERK/MAPK和PI3K/AKT通路关键蛋白的表达和磷酸化情况。

  我们发现索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))并没有显着影响的蛋白质表达c-Met,ERK1/2和AKTpMet的磷酸化,但显著减少了活跃的磷酸化/1/2和pAKT,证实索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))的作用抑制ERK1/2/MAPK途径针对RAF,11M2-CM或重组HGF与索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))显著延长c-Met的表达和pMet的磷酸化,pERK1/2,pAKT;在M2-CM与索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))结合时加入抗hgf抗体,其效果与单独索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))相同。综上所述,结果表明(a)索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))本身并不影响HGF/c-Met讯号,而是通过靶向RAF抑制ERK1/2/MAPK讯号,并通过ERK1/2/MAPK途径或其他机制抑制PI3K/AKT讯号;(b)M2巨噬细胞分泌的HGF激活HGF/c-Met讯号通路以及下游的ERK1/2/MAPK和PI3K/AKT通路。的确,PI3K被证明参与了hcc的索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))耐受药物。

  在这项研究中,我们将展示HGF促进肝癌细胞和M2巨噬细胞的迁移,表明HGF分泌肿瘤M2巨噬细胞可能招募更多的巨噬细胞进入肿瘤,调节M2巨噬细胞在肿瘤组织内的分布,从而提高肿瘤前馈方法抵抗索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))。我们进一步开发了裸鼠肝癌细胞传代、索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))诱导医治小鼠、小鼠传代肿瘤细胞植入小鼠的移植抗索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))和索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))敏感模型。

  我们发现SR肿瘤中F4/80+/CD206+双阳性M2巨噬细胞明显高于SS肿瘤。短期索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))处置减少了F4/80+/CD206+M2巨噬细胞的数量,而长期暴露索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))则延长了HGF的合成和分泌,同时延长了c-Met和pMet的水平。由于索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))也是一种抗血管生成药品,其抗癌作用可能与抗血管生成活性、肿瘤外不良反应、甚至某些情况下肿瘤转移扩散有关。我们通过CD31染色检测SR和SS肿瘤的血管系统。内皮密度在SR肿瘤和SS肿瘤之间没有显著差异,但是SR肿瘤比SS肿瘤存在更多的大血管,提示这些大血管可能也促进了索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))耐受药物。

  在HCC临床样本中,我们注意到CD206+M2巨噬细胞在癌周区域大量积聚,其中有49个细胞c-Met高表达。多变量分析中c-Met表达上升与生存差独立相关。重要的是,最近对关键的索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))III期试验样本的生物标志物分析显示,医治前血浆HGF浓度较低的患病者生存几率有提高的趋势,突出了肿瘤相关M2巨噬细胞和HGF在肿瘤对索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))反应中的临床重要性。Cabozantinib,另一个多激酶抑制剂c-Met最有效的抑制,最近被证明改善总体生存中值从8.0到10.2个月作为第二线代理天体HCC.61的III期试验一起,我们假定索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))的组合Cabozantinib将可能改善第一行系统性医治效果。

  总之,我们证明肿瘤相关的M2巨噬细胞而不是M1巨噬细胞延长了肝癌细胞的生长和迁移,通过分泌HGF使肝癌对索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))医治产生耐受药物性。M2巨噬细胞的HGF和肿瘤细胞激活肿瘤细胞中的HGF/c-Met、MAPK/ERK1/2和PI3K/AKT通路,从周围血液循环中吸收更多巨噬细胞,调节M2巨噬细胞在肿瘤组织中的分布,并以前馈方法延长肿瘤对索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))的抗性。我们的研究结果为索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))在HCC中的耐受药物性提供了新的见解,并提倡开展一线系统医治的新试验,将索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))与强效HGF抑制剂cabozantinib联用,以提高一线系统医治的治疗效果。索拉非尼(sorafenib)(多吉美(tosylate))哪儿的便宜些呢?能够通过[药道网]选购印度的仿制药物。详情请扫码咨询:

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